烏藥不同提取物對小鼠胃腸運動調(diào)節(jié)作用的實驗討論論文
烏藥為樟科山胡椒屬植物烏藥Lindera aggregata (Sims)Kosterm.的膨大塊根，具有溫中散寒、理氣止痛的功效。史書有載烏藥可治“惡心腹痛，宿食不消……”，臨床上常與多種中藥配伍，治療寒凝氣滯所致的脘腹疼痛。現(xiàn)代藥理研究表明烏藥具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗氧化、調(diào)節(jié)平滑肌等廣泛的藥理活性。為明確其對胃腸道的調(diào)節(jié)功能，本課題初步探討烏藥不同提取液對消化系統(tǒng)方面的影響。
1 材料與方法
1.1 動物健康KM小鼠，清潔級，體重18-22 g，雌雄各半，長沙市開福區(qū)東創(chuàng)實驗動物科技服務(wù)部代購，動物合格證號：SCXK(湘)2009-0012。
1.2 藥物烏藥購于湖南岳陽醫(yī)藥總公司中藥飲片加工廠長沙經(jīng)營部，經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室鑒定為樟科植物烏藥Lindera aggregate(Sims)Kosterm.的干燥塊根。取烏藥200 g，加5倍量水，經(jīng)揮發(fā)油提取器提取12 h，得揮發(fā)油0.5 mL保存;藥液，過濾，濾渣煎煮1次，過濾，合并兩次濾液，最后濃縮成1 g生藥/mL的藥液。濾渣加75%乙醇回流，得浸膏1.5 g，置冰箱內(nèi)供實驗備用。甲硫酸新斯的明注射液(浙江仙琚制藥股份有限公司，批號：120102)，硫酸阿托品注射液(浙江金力制藥有限公司，批號：20130102)。
1.3 樣品處理揮發(fā)油加5%吐溫-80乳化，乙醇提取物配置時加適量二甲基亞砜。助溶劑量藥效試驗不干擾藥理活性。
1.4 統(tǒng)計學(xué)方法實驗數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標準差(x±s)表示，用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析。進行正態(tài)性檢驗;多組計量資料采用one-way ANOVA。
2 結(jié)果
2.1 烏藥不同提取物對新斯的明引起的小腸推進亢進的影響小鼠按隨機數(shù)字表法分為6組，每組10只。分別為正常對照組、模型對照組、阿托品組(0.3 mg/kg)、烏藥水提取物組(0.948 g/kg)、烏藥醇提取物組(0.074 g/kg)、烏藥揮發(fā)油提取物組(5.8 μL/kg)，各組分別給予相應(yīng)藥物，1次/d，連續(xù)3 d，對照組給予等容積蒸餾水。實驗前動物禁食12 h，自由飲水末次給藥后1 d，各組動物按0.5 mL/kg皮下注射新斯的明(0.5 g/L，0.25 mg/kg)，正常對照組皮下注射生理鹽水，20 min后各組動物灌服5%炭末生理鹽水混懸液0.2 mL/10g，灌服炭末生理鹽水混懸液20 min將小鼠頸椎脫臼法致死，打開腹腔剪取幽門至回盲部的腸管，不加牽引平鋪于托盤上，測量小腸全長及炭末在腸內(nèi)推進的距離，計算炭末推進百分率。
模型對照組和正常對照組小腸推進率之差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示模型對照組動物小腸推進率高于正常組，說明造模成功。而3個實驗組之間該項指標差異無統(tǒng)計學(xué)意義，烏藥不同提取物對新斯的明引起的小腸推進亢進的影響作用相近。
2.2 烏藥不同提取物對阿托品引起的小腸推進抑制的影響
小鼠按隨機數(shù)字表法分為5組，每組10只。分別為正常對照組、模型對照組、烏藥水提取物組(0.948 g/kg)、烏藥醇提取物組(0.074 g/kg)、烏藥揮發(fā)油提取物組(5.8 μL/kg)。第4天給藥后40min，除正常對照組外，剩余4組均腹腔注射阿托品0.3mg/kg，20 min后各組動物灌服5%炭末生理鹽水混懸液0.2 mL/10 g，灌服炭末生理鹽水混懸液20 min將小鼠頸椎脫臼法致死，打開腹腔剪取幽門至回盲部的.腸管，不加牽引平鋪于托盤上，測量小腸全長及炭末在腸內(nèi)推進的距離，計算炭末推進百分率。
模型對照組和正常對照組小腸推進率之差異有統(tǒng)計學(xué)意義有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示模型對照組動物小腸推進率高于正常組，說明造模成功。而3個實驗組之間該項指標差異無統(tǒng)計學(xué)意義，提示烏藥不同提取物對阿托品引起的小腸推進抑制的影響作用相近。
3 討論
胃腸道疾病在世界范圍內(nèi)都是發(fā)病率較高的疾病之一，其中以胃腸道蠕動障礙尤為多見，胃腸道蠕動障礙具有反復(fù)性和多發(fā)性不同程度的影響患者的生活質(zhì)量。促進胃腸道的蠕動，增強腸道收縮，有利于對抗患者術(shù)后胃腸道麻醉性功能障礙，胃腸道的功能恢復(fù)影響患者的整體康復(fù)質(zhì)量。
烏藥作為重要的溫胃理氣止痛藥之一，主要含有揮發(fā)油、異喹啉類、生物堿及呋喃倍半萜3大類成分，現(xiàn)代藥理表明其具有良好的鎮(zhèn)痛、消炎、擴張血管、抗疲勞等作用。文獻報道烏藥對胃腸平滑肌既有促進腸蠕動增強腸收縮的功效，又能抑制胃腸平滑肌，緩解其痙攣。據(jù)臨床試驗表明烏藥有促進胃腸運動功能的作用，能明顯改善消化不良者的臨床癥狀。課題組前期對烏藥不同提取物劑量進行了篩選，試驗表明各提取物的高劑量促進正常小鼠的炭末推進作用最強，因此，本實驗以為考察劑量。實驗結(jié)果表明烏藥不同提取物對新斯的明致的小鼠小腸推進功能亢進有一定抑制作用，對阿托品致的小鼠小腸推進功能抑制有一定促進作用，具有雙向調(diào)節(jié)作用。此次研究可為藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)提供依據(jù)，也為烏藥的臨床應(yīng)用及其多層次的開發(fā)利用奠定了一定的基礎(chǔ)。但對烏藥理氣止痛物質(zhì)基礎(chǔ)方面的研究，應(yīng)當綜合化學(xué)、藥理等多學(xué)科技術(shù)對烏藥進一步的進行系統(tǒng)研究。
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