細胞生長曲線的繪制實驗報告

時間：2020-10-07 17:37:45 報告我要投稿

細胞生長曲線的繪制實驗報告范文

　　篇一：實驗五微生物生長量的測定及生長曲線的繪制

細胞生長曲線的繪制實驗報告范文

　　一、實驗目的

　　學習了解微生物生長量測定的方法

　　學習了解細菌生長曲線的繪制方法

　　學習掌握血細胞計數板的使用方法

　　（一）微生物生長量的測定

　　計數法重量法生理指標法

　　1、顯微鏡直接計數法

　　（1）利用血細胞計數板計數

　　（2）涂片計數

　　2、活菌菌落計數法

　　3、濾膜法

　　（二）細菌生長曲線

　　將單細胞細菌接種到恒定容積的液體培養基中，不補充營養物或移去培養物，細菌以二分裂方式繁殖，以時間為橫坐標，細菌數目的對數值為縱坐標，可畫出一條反映細菌在整個培養期間菌數變化規律的曲線，稱為生長曲線（growth curve）

　　篇二：細胞生長曲線的測定

　　細胞生長曲線的測定

　　一、實驗目的

　　掌握測定細胞生長曲線的.方法。

　　二、實驗器具

　　24孔細胞培養板、微量加樣器、eppendorf管、吸頭、吸頭盒、顯微鏡、細胞計數板、載玻片、蓋玻片、吸管、試管架、普通顯微鏡、細胞懸液、0.4%臺盼藍。

　　三、實驗方法

　　1. 培養細胞：首先在24孔細胞培養板內分別接種相同數量的細胞，計數并記錄接種的細胞懸液密度，接種時間記為0小時。

　　2. 計數細胞密度：從接種時間算起，每隔24小時計數3孔的細胞密度，算出平均值。為提高準確率，對每孔細胞可計數2-3次，如此操作至第七天結束。

　　3. 繪制曲線：以培養時間為橫坐標、細胞密度為縱坐標，將全部結果在坐標紙上繪圖，即得所培養細胞的生長曲線。

　　篇三：MTT法繪制生長曲線

　　實驗材料：

　　1，5%FBS-L-DMEM, 5x104個/ml細胞懸液，5mg/mlMTT溶液，DMSO,0.01M PBS,2, 96孔板共7個,酶標儀,50ml離心管，1.5ml離心管，0.22μm濾膜，錫箔紙，MTT工作液（1ml/管）

　　實驗步驟：

　　1，分別選取生長良好的P1、P3、P5代BMSCs消化后制備成細胞懸液，調整細胞密度為5x104/ml。接種到96孔板，每孔接種200μl細胞懸液進行培養（每孔1x104細胞）。

　　2，培養16-48后，每天選擇6個培養孔各自加入MTT溶液（5mg/ml）20μl，37℃繼續孵育。

　　3，孵育4h后終止培養，吸出孔內上清，此時應該傾斜96孔板，用槍頭小心的將上清液吸去，不可吸去下面的結晶顆粒，慢慢吸去。每孔加入150μlDMSO,室溫振蕩10min，使結晶充分溶解，于試驗孔平行設不加細胞只加培養液的空白對照1孔。

　　注意事項：

　　【1】 1, 兩種方法分離小型豬骨髓間充質干細胞的比較

　　分別取兩組0,1,3代細胞，制成1x103的細胞懸液，接種到96孔板，每孔細胞懸液200微升，置37℃、5%CO2飽和濕度孵箱內孵育，各組每24小時分別取出4孔，每孔加入MTT（2mg/ml）20微升 37℃孵育，4h后吸棄孔內培養液，每孔加入150微升分析純的二甲基亞砜，移至酶聯免疫檢測儀上振蕩10min,用分光光度計在492nm波長處測定每孔的吸光度值（OD492），以OD(492)值為縱坐標，時間為橫坐標繪制生長曲線

　　【2】來自：SD大鼠骨髓間充質干細胞體外分離培養的實驗研究

　　大鼠MSCs生長曲線測定：為了定量測定大鼠BMSCs的生長狀況，對來源于同一動物的原代細胞進行連續培養。分別選取生長良好的P1、P3、P5代BMSCs消化后制備成細胞懸液，調整細胞密度為5x104/ml。接種到96孔板，每孔接種200μl細胞懸液進行培養（每孔1x104細胞）。次日起每天選擇6個培養孔各自加入MTT溶液（5mg/ml）20μl，37℃繼續孵育4h后終止培養，吸出孔內上清，每孔加入150μlDMSO,室溫振蕩10min，使結晶充分溶解，于試驗孔平行設不加細胞只加培養液的空白對照1孔。在酶標儀上選擇570nm波長，以空白孔調零，測定各孔吸光度（A）值，連續測7天，以時間為橫軸，A值為縱軸繪制細胞生長曲線。

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