盤點ELSD總結
盤點ELSD總結
一、蒸發光散射檢測器（ELSD）
蒸發光散射檢測器（Evaporative Light-scattering Detector）是通用型質量檢測器，理論上所有的物質都能用ELSD檢測出來，但對色譜柱、流動相、化合物本身等有一定的要求。
ELSD的基本原理可概括為3個過程：
1、霧化：色譜柱流出液在載氣的作用下在霧化室內轉變成細小的液滴（氣溶膠）。
2、蒸發：載氣把液滴從霧化室運送到漂移管進行蒸發，在漂移管中，溶劑完全被除去，留下微粒或純溶質的小滴。
3、檢測：溶質顆粒（固體）從漂移管出來后進入光檢測池，穿過激光光束，即產生散射，再轉變成為信號。注意：由于溶劑在漂移管中完全蒸發，所以有很多氣態的溶劑被載氣帶入檢測器，但氣體經過光束時，不會影響光的穿透，即不會影響光的散射，不會產生任何信號，所以ELSD的信號中沒有溶劑峰。
ELSD目前有兩種類型：1、讓全部色譜柱流出物都進入直的漂移管，流動相在其中蒸發；2、讓全部色譜柱流出物通過一個彎管，在此管中大的顆粒沉積下來流入廢氣管，其余的小顆粒進入螺旋狀的蒸發管。后一種類型的ELSD檢測到的樣品量其實比實際的要小，但液滴更均勻�，F在有可以在一臺儀器上兩種類型互變的ELSD，可根據需要選擇。
ELSD的主要影響因素：
1、載氣：由于色譜柱流出液需要被霧化，且霧化后液滴的大小和均勻性是保證ELSD的靈敏度和重復性的重要因素，所以霧化氣流的純度和壓力（流速）會影響檢測器的信噪比。所用的載氣要求純度高，不含顆粒物等非揮發性的物質，當被測物容易被氧化時，不能使用空氣而要用氮氣做載氣；壓力也要適中；另外，溶質顆粒在進入光檢測池時被輔助載氣所包封，避免溶質在檢測池內的分散和沉淀在壁上，保證了檢測池的清潔。
2、霧化溫度：ELSD通過對氣壓和溫度的精確控制，確保在霧化室內形成一個較窄的液滴尺寸分布，使液滴蒸發所需要的溫度大大降低，維持了顆粒的均勻性，在不使被測物質蒸發的前提下，溫度越高，流動相蒸發越完全，色譜圖基線越好、信噪比越高，但溫度太高會導致流動相沸騰，增加背景噪聲，溶質部分
氣化，信號變小，降低信噪比。
ELSD的優點：
1、適用于檢測揮發性低于流動相的任何樣品，包括吸收、不產生熒光）的物質（如人參皂苷、黃芪甲苷、糖類、高級脂肪酸、磷脂、維生素、氨基酸、甘油三酯及甾體等）。
2、流動相低溫霧化和蒸發，對一些熱不穩定、半揮發性化合物，可以通過調節蒸發溫度來使比被測物質沸點低的組分蒸發，所以可以檢測部分熱不穩定或半揮發性的化合物。
3、由于流動相和溶劑蒸發了，使用ELSD檢測器收集的色譜圖劑峰，而且梯度洗脫沒有折光視差效應（示差折光檢測器有），一般不會出現基線漂移。
4、檢測光的散射變化，所有進入到散射池的物質都可被檢測，而且響應值只與物質的量（質量）有關。
5、輔助載氣提高了檢測靈敏度，保持檢測池內的清潔，避免污染。
6、高精度霧化和蒸發溫度控制，保證高精度檢測；
7、可與任何HPLC、SFC（超臨界流體色譜）系統連接。
ELSD的缺點：
1、流動相要全部蒸發掉，所以冰醋酸、甲酸、TFA，氨水、三乙胺等）。
2、如果被測物質沸點接近或低于流動相的蒸發溫度，則無法檢測。 3、濃度跟峰面積不成線性，分別取自然對數后成線性。
4、需要配置高壓氮氣或空氣，使用不便，且實驗中產生廢氣有害。
ELSD的靈敏度較紫外和熒光檢測器稍低，但比示差折光檢測器高，對溫度變化不敏感，基線穩定，適合與梯度洗脫液相色譜聯用。示差檢測器（RI）靈敏度低，與梯度脫洗不相容。質譜是另一種通用型檢測器，但它的費用昂貴、操作復雜。
度范圍內，大致呈線性；而在較低濃度范圍內，則大致呈指數關系，即Y=aXb，
其中的b值往往為1-2。這一點可能與液滴進入到漂移管后的現象有關，液滴進入到漂移管后有3個現象：1、易揮發的部分蒸發；2、一些顆粒落到漂移管的管壁上；3、一些顆粒凝結在一起。
探討：
ELSD很多人都說它重現性很差，其實我根據我自己的經驗，重現性差一般是指其峰面積重現性較差（和UV比較），但其色譜條件的重現性還是比較穩定的。至于標準曲線的做法，目前沒有定論到底以峰面積和濃度直接做線性還是用自然對數、常用對數。實驗時可先用峰面積和濃度直接做線性，如果相關系數不好，再嘗試用對數關系（自然對數或常用對數）。當對照品和供試品溶液接近時，可以考慮做一個比較窄的范圍做線性，如果直接用兩點法做計算的話，必須有數據支持。至于做隨行對照的問題，按正規要求，不只ELSD，其他檢測器的液相也應該這樣做，只是因為儀器相對的穩定性所以大家都不做，對于ELSD當然做隨行對照最好。蒸發溫度開始可以設高些，如果基線沒問題再慢慢調整到最佳溫度流速。ELSD為質量型檢測器，所以樣品的預處理就相對更重要些，盡可能地分離純化將會使你的方法學更容易建立，太多的成分在里面容易干擾正常檢測。
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